小鼠去卵巢心肌缺血再灌注模型構建

一、模型構建目的

該模型主要用于模擬絕經后女性因雌激素水平下降導致的心血管疾病易感性，探究雌激素缺乏與心肌缺血再灌注損傷的關聯。例如，研究顯示去卵巢后的小鼠心肌損傷加重，而中藥桃紅四物湯通過激活Nrf2/HO-1通路可減輕這種損傷。

二、構建步驟

1. 去卵巢手術

• 動物選擇：6-8周齡雌性小鼠，確保性成熟且未自然絕經。

• 手術方法：實施雙側卵巢切除術，che底清除雌激素來源，術后需等待2-4周以模擬穩定的絕經狀態。

2. 心肌缺血再灌注手術

• 麻醉與準備：采用腹腔注射麻醉（如戊ba比妥鈉），氣管插管連接呼吸機維持呼吸。

• 手術入路：左胸外側切口，鈍性分離肌肉至第3-4肋間隙，撐開胸腔暴露心臟。

• 缺血操作：結扎左前降支冠狀動脈（LAD）30-60分鐘，造成心肌缺血；松開結扎線恢復血流模擬再灌注（通常持續2-24小時）。

• 關胸與縫合：逐層縫合胸腔，術后撤除呼吸機并監測自主呼吸恢復。

三、術后管理

• 鎮痛與抗感染：術后給予bu托啡諾等鎮痛藥物，并預防性使用抗生素。

• 生命體征監測：觀察小鼠活動、呼吸及心電圖變化，確保術后恢復穩定。

四、模型評估方法

1. 功能評估：

• 心電圖（ECG） ：檢測ST段抬高、T波倒置等缺血再灌注特征性變化。

• 心臟超聲：評估左室射血分數（LVEF）等血流動力學指標。

2. 組織學評估：

• TTC染色：量化心肌梗死面積，正常心肌呈紅色，壞死區域蒼白。

• HE染色：觀察心肌炎癥細胞浸潤及組織結構破壞。

3. 生化指標：

• 檢測血清CK-MB、cTnI等心肌損傷標志物，以及TNF-α、IL-6等炎癥因子水平。

五、研究應用示例

1. 機制研究：

• TSPYL5蛋白在缺血再灌注后表達顯著下調，提示其可能與損傷相關。

• Rho激酶抑制劑（如法舒地爾）通過抑制白細胞聚集減少心肌梗死面積。

2. 藥物干預：

• bu托啡諾預處理可降低Caspase-3活性及炎癥反應，減輕心肌損傷。

• 鹽酸戊乙奎醚通過調節MIF/AMPK通路發揮保護作用。

3. 基因調控：

• 敲除vaspin基因加重損傷，而過表達HINT2基因可改善微循環及線粒體功能。

六、注意事項

• 手術技巧：需精細操作以減少胸腔出血和應激反應，避免影響實驗結果。

• 模型穩定性：曾有報道稱模型可能出現重復性問題，可能與麻醉深度、結扎位置或術后護理有關。

• 代謝影響：去卵巢可能改變小鼠代謝狀態（如糖脂代謝），需在實驗中設置對照組。