上海免疫共沉淀（Co-IP）

上海免疫共沉淀（Co-IP）

Co-IP是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質功能的實驗方法。Co-IP是在IP的基礎上衍生出來的實驗方法，是證明蛋白相互作用的金標準。通過檢測免疫沉淀下來的蛋白復合物來證實中是否存在與X蛋白相互作用的Y蛋白。其基本原理是，在細胞裂解液中加入抗X蛋白的抗體，孵育后再加入與抗體FC片段特異結合的Protein A/G-瓊脂糖微珠，若細胞中有與Y結合的X蛋白，就可以形成這樣一種復合物： Y—X—抗X抗體—Protein A或G ，經變性聚丙烯酰胺凝膠電泳，復合物又被分開。然后經免疫印跡或質譜檢測目的蛋白。這種方法得到的目的蛋白是在細胞內與興趣蛋白天然結合的，符合體內實際情況，得到的結果可信度高。

上海免疫共沉淀（Co-IP）
客戶需要注意的是Co-IP方法可能檢測不到低親和力和瞬間的蛋白質－蛋白質相互作用；同時如果檢測到有相互作用并不能完整表明生理狀態下共定位，此外檢測到的兩種蛋白質的結合可能不是直接結合，而可能有第三者在中間起橋梁作用；后在實驗前預測目的蛋白是什么，以選擇后檢測的抗體，所以，若預測不正確，實驗就得不到結果，方法本身具有風險,另外客戶可以選擇Co-IP得到的樣品利用質譜進行后續分析.

服務內容和流程：
1）用其特定蛋白的抗體與ProteinA/G相結合(Flag IP Kit已結合上)；
2）用抗體成點特定蛋白，特定蛋白已結合了與其相互作用蛋白；
3）通過洗滌得到純復合蛋白后用感興趣蛋白抗體通過WB方法檢測其IP結果；
4）提交WB圖與分析結果和實驗報告。
您只需提供：
表達待研究蛋白的細胞以及相關的抗體。
我們提供：
完整的免疫共沉淀實驗報告單。電子版掃膜結果及灰度值分析。