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產(chǎn)品中心心血管相關疾病研究心血管相關原代分離心血管相關原代分離
產(chǎn)品簡介
心血管相關原代分離（原代培養(yǎng)心肌細胞）作為一種主要的體外研究模型，被廣泛應用于心血管研究之中。常用于電生理、心肌損傷修復、心肌缺血再灌注損傷機制和藥物保護心肌的機制研究。我們經(jīng)過長期嘗試，摸索出了一些行之有效的方法，能夠獲得純度高、活性好的原代新生大鼠、小鼠心肌細胞。
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原代培養(yǎng)心肌細胞作為一種主要的體外研究模型，被廣泛應用于心血管研究之中。常用于電生理、心肌損傷修復、心肌缺血再灌注損傷機制和藥物保護心肌的機制研究。我們經(jīng)過長期嘗試，摸索出了一些行之有效的方法，能夠獲得純度高、活性好的原代新生大鼠、小鼠心肌細胞。
分離方法：
新生大鼠或小鼠心肌細胞常用II型膠原酶消化法。例如，通過剪碎心臟組織后，用0.05% II型膠原酶預消化去除血細胞，再用0.1% II型膠原酶分階段消化（12分鐘+4分鐘），結合差速離心或Percoll密度梯度離心分離心肌細胞，存活率可達80%以上。成年心肌細胞則需優(yōu)化酶解條件，如添加布雷他汀（Blebbistatin）以抑制收縮損傷，提高活力和電生理特性。
關鍵優(yōu)化：
鼠齡選擇：新生1-3日齡乳鼠心肌細胞增殖能力較強，分離后貼壁快、存活率高；成年心肌細胞需更精細的酶解流程。
培養(yǎng)基與基質(zhì)：MEM培養(yǎng)基結合層粘連蛋白基質(zhì)可維持心肌細胞形態(tài)和功能。
凍存技術：優(yōu)化冷凍保存液（如含DMSO和血清）可實現(xiàn)66%以上的細胞回收率，且功能損傷極小。
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