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      牙周膜牽張成骨快速牙移動動物模型

      更新時間:2018-07-06點擊次數:1989

      牙周膜牽張成骨快速牙移動動物模型

      (1)復制方法  體重為12~15kg,年齡為10~24月齡的Beagle犬,隨機選擇犬一側下頜為實驗側,另一側為對照側。實驗側裝置在石膏模型上用不銹鋼帶環片制作、第三前磨牙帶環,點焊固定在螺旋擴大器的兩端。對照側裝置在第三、四前磨牙上制作帶環,其上分別點焊托槽及直絲頰面管,在前磨牙上粘接托槽,以0.42mm×0.61mm不銹鋼方絲連接各部件,經犬靜脈按0.6mg/kg體重的劑量注射30g/L戊丨巴丨比丨妥丨鈉麻醉,拔除下頜雙側第二前磨牙,實驗側行牙槽間隔減阻術,之后雙側黏結實驗裝置。實驗側從術后第1日起,每天旋轉加力2次,每次1/4圈(0.25mm),至第14日停止加力,并進入保持期;對照側在、四前磨牙間置鎳鈦螺簧,加力1.96N,此后不再調節,14d時去除鎳鈦螺簧,結扎進入保持期。每側在預定的實驗日進行X線檢查拍片,拍片時動物取仰臥位,下頜下緣與水平面平行,將咬合片置于舌下。模型動物于預定的實驗終止日處死,切取實驗側、對照側標本,做好標記后立即置放于甲醛固定液中固定,再移至復合酸脫鈣液中脫鈣,沿頜骨及牙長軸矢狀作常規組織切片,HE染色和骨形成蛋白(Bone Morphogenetic Protein, BMP)McAb免疫組織化學染色,鏡下觀察;并應用彩色病理圖像免疫組化測量系統,對每張免疫組化染色后的切片作BMP定量分析。

      (2)模型特點  X線觀察實驗側和對照側均未發現明顯根吸收,牙槽嵴高度降低和支抗喪失等不良反應;鏡下病理組織學觀察顯示,2周時實驗側張力側牙周膜顯著增寬,成纖維細胞和成骨細胞豐富,血管擴張,有散在的血細胞;牙槽骨側新生板狀骨沿牽張力方向呈指突狀,其表面排列有單層成骨細胞,新骨與原有牙槽骨間骨沉積線明顯;牙骨質側可見一層新生牙骨質,其上可見成牙骨質細胞。壓力側牙周膜間隙變窄,無細胞的均質狀透明樣變性區較少見,多為組織的水腫和細胞的空泡樣變;間隔骨表面已可見較多的破骨細胞及骨吸收陷窩。3周時張力側牙周膜稍寬,細胞仍較豐富;牙槽骨側新生板狀骨相互連接呈松散的網狀,可見大的骨髓腔,表面排列一層成骨細胞。壓力側牙周膜寬度稍窄,細胞成分增多,組織水腫減輕,原有致密間隔骨逐漸消失,代之以疏松的骨質。6、8周時張力側牙周膜已基本恢復正常,牙槽骨側新生骨連接成編織狀,骨小梁粗大,隨時間鈣化增強。壓力側亦為同樣的表現。對照側2周時張力側牙周膜增寬,細胞較豐富,血管擴張,有散在血細胞;牙槽骨表面可見一薄層新骨基質的沉積帶,淡染,骨沉積線不甚明顯,其表面可見成骨細胞,間隔骨底部可見骨折線。壓力側牙周膜寬度縮窄,透明樣變性區較大,有的區域可見骨吸收陷窩,破骨細胞較少見。3周時張力側牙周膜已恢復正常,牙槽骨表面新骨基質已開始鈣化,其表面可見成骨細胞,骨沉積線較明顯。壓力側牙周膜寬度仍較窄,透明性變區已局限,間隔骨表面可見較多的骨吸收陷窩。6、8周時張力側、壓力側牙周膜均已基本恢復正常,牙槽骨表面新骨基質已鈣化。BMP McAb免疫組化結果表明,BMP在犬牙周組織中主要分布在牙周膜區域,尤其是在鄰近牙槽骨及牙骨質區域染色呈強陽性;成骨細胞,破骨細胞,成纖維細胞染色均呈強陽性;染色強度張力側強于壓力側,骨改建尤其是成骨活躍區域染色相應也呈強陽性。

      (3)比較醫學  牽張成骨的基本原理是當機體組織受到緩慢而穩定的牽引和張力時,細胞的增殖與合成功能即被活化,從而促進組織的再生,這一方法很可能對正畸治療產生革命性的影響。在本模型制作過程中,在2周的加力期間里,實驗側牙齒移動與對照側牙齒移動有極度顯著性差異,表明實驗側前磨牙的移動速度遠大于對照側,而且并未發現有其他不良反應。BMP作為骨生長的促進因子,主要的靶細胞是未分化的間充質細胞,還有成纖維細胞等結締組織細胞。以往研究認為,BMP主要參與機體的成骨活動,誘導組織中的間充質細胞分化,并形成軟骨細胞及骨細胞。BMP誘導成骨的作用已被大量的試驗所證實。本方法復制的模型表明,牙周膜牽張成骨快速牙移動技術可大大提高正畸牙移動速度,成骨活性高,且無明顯根吸收、牙槽嵴高度降低和支抗喪失等不良反應。因此,本模型可為臨床正畸提供一種新方法、新思路。但是,牙周組織改建是一個復雜的過程,對于其他的一些生長因子(如TGFβ、bFGF、IGF等),以及其他一些因素(如膠原和其他一些非膠原蛋白)的調控和影響作用也不能忽視。因此,認識各種因素的協同作用,對進一步深入了解牙周膜牽張成骨的機制具有重要意義。

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